ПризначенняІФА-набір EQUI SARS-CoV-2 IgA призначений для якісного виявлення антитіл класу IgA до вірусу SARS-CoV-2 у сироватці чи плазмі крові людини методом імуноферментного аналізу (ІФА) з метою діагностики COVID-19. Процедура аналізу розрахована як для ручної постановки з автоматичними піпетками та стандартним обладнанням, так і для автоматичного імуноферментного аналізатора «відкритого» типу. Цільова група: пацієнти з симптомами ГРВІ, особи, які перебували в контакті з хворими на COVID-19, медичні працівники та інші особи, що перебувають у епідеміологічній зоні. Застосування: ІФА-набір застосовується у клінічних діагностичних лабораторіях та інших установах, які працюють в області in vitro діагностики.Кліничне значення SARS-CoV-2, який є причиною захворювання COVID-19, належить до родини коронавірусів (Coronaviridae) – сферичних РНК-вмісних вірусів діаметром 80-160 nm. Геном коронавірусів – однониткова лінійна молекула нефрагментованої РНК, що кодує 4 основних структурних білки вірусу: S-білок – глікопротеїн, який формує шипи на поверхні вірусних часток; М-білок – мембранний; N-білок – нуклеокапсидний; Е-білок – оболонковий. Білки N та S є основними імуногенними білками CoV. SARS-CoV-2 за способом передачі та симптомами подібний до SARS-CoV та ряду інших респіраторних захворювань. Так, симптоми є типовими для вірусної пневмонії і включають підвищення температури, сухий кашель, біль у горлі та головний біль. Більшість випадків зараження супроводжується легким протіканням або проявами середньої тяжкості, однак є випадки із тяжким протіканням із задишкою та утрудненим диханням. Також у інфікованих SARS-CoV-2 може розвиватись гострий дихальний дистрес-синдром. Найбільша вірогідність тяжкого протікання хвороби серед людей похилого віку, особливо серед тих, у кого є супутні захворювання, включаючи серцево-судинні захворювання та діабет. Встановлення точного діагнозу COVID-19 має важливе значення не тільки для забезпечення належного лікування пацієнтів, але і для полегшення виявлення інфікованих SARSCoV-2 людей, у тому числі безсимптомних носіїв, яких потрібно ізолювати для обмеження поширення вірусу. Оскільки на чутливість ПЛР-аналізу для виявлення SARS-CoV-2 може впливати гетерогенність зразків матеріалу з респіраторного тракту та анатомічне місце збору проби (мазок з горла, слина або ендотрахеальний аспірат), існує нагальна потреба у розробці альтернативних засобів діагностики. Виявлення антитіл до SARS-CoV-2 методом ІФА має високе діагностичне значення. Антитіла класів IgM та IgA починають виявлятися в середньому на 5 день від появи симптомів, їх рівень зростає до 14 дня. Антитіла класу IgG починають виявлятись на 0–7 дні, їх концентрація зростає з 8 по 21 день, після чого виходить на плато. В останніх дослідженнях тестування на наявність антитіл було визнано більш чутливим, ніж виявлення вірусної нуклеїнової кислоти, починаючи приблизно з 8-го дня від появи симптомів. Є дані, що концентрація антитіл класу IgM до SARS-CoV-2 має кореляцію з виявленням РНК вірусу. Поєднання виявлення антитіл класів IgM та IgG до SARS-CoV-2 з ПЛР тестом може бути найкращим лабораторним показником для діагностики в даний час. Виявлення антитіл методом ІФА буде також актуальним для пізніх стадій зараження після елімінації вірусу, оскільки дає змогу визначити наявність протективного імунітету у осіб, що перехворіли чи були вакциновані, а також моніторити ступінь поширення вірусу та наявність імунітету населення на суспільному рівні. Тому тестування на наявність антитіл може бути доречним у таких умовах: 1) діагностика пацієнтів, які звертаються за медичною допомогою через 7 і більше днів від появи симптомів; 2) контактне відстеження; 3) виявлення безсимптомних носіїв; 4) визначення імунного статусу та ризику зараження; 5) сероепідеміологічні дослідження для визначення ступеня поширення COVID-19.Принцип аналізуВизначення антитіл класу IgA до SARS-CoV-2 в ІФА-наборі «EQUI SARS-CoV-2 IgA» базується на принципі «непрямого» твердофазного ІФА у двоетапній інкубації. У лунках планшета засорбовано рекомбінантні антигени SARS-CoV-2 – субодиниця S1 шипового глікопротеїну та нуклеопротеїн (NP). Під час першого етапу інкубації досліджуваних зразків у лунках планшета ІФА специфічні до SARS-CoV-2 антитіла, якщо вони присутні у зразках, зв’язуються з антигенами на твердій фазі. Лунки відмиваються для видалення незв’язаних антитіл, залишаються лише специфічні комплекси антиген-антитіло. Після цього додається кон’югат антивидових анти-IgA моноклональних антитіл з пероксидазою хрону, який зв’язується з імунними комплексами на твердій фазі. Незв’язані компоненти видаляються під час відмивання. Комплекси антиген-антитіло виявляються шляхом додавання розчину хромогену 3,3’,5,5’-тетраметилбензидину (ТМБ) з перекисом водню. Після 20-ти хвилинної інкубації реакція зупиняється додаванням стоп-розчину. Оптична густина (ОГ) в лунках визначається на спектрофотометрі при довжині хвилі 450/620- 695 nm. Інтенсивність жовтого забарвлення пропорційна кількості антитіл у зразку.Матеріали та обладнанняСклад наборуSTRIPS 1 x 96 лунокПланшет ІФА У кожній лунці планшета засорбовано рекомбінантні антигени SARS-CoV-2 – субодиниця S1 шипового глікопротеїну та нуклеопротеїн (NP). Лунки можна відокремлювати. Після першого відкриття зберігайте невикористані стрипи в упаковці за температури 2-8°C не більше 3 місяцівCONTROL + 1 x 0,2 mlПозитивний контроль Розчин імуноглобулінів, специфічних до SARS-CoV-2, з консервантом (рожевий). Зберігати за температури 2-8°CCONTROL - 1 x 0,6 mlНегативний контроль Негативна сироватка крові людини з консервантом (жовтий). Зберігати за температури 2-8°CDIL SAMPLE 1 x 13 mlРозчин для розведення сироваток Буферний розчин з екстрактом молока, детергентом та консервантом (коричневий). Зберігати за температури 2-8°CSOLN CONJ 1 x 13 mlРозчин кон’югату (готовий до використання) Буферний розчин моноклональних антитіл до IgA людини, кон’югованих з пероксидазою хрону, зі стабілізаторами та консервантом (зелений). Зберігати за температури 2-8°CSOLN TMB 1 x 13 mlРозчин ТМБ (готовий до використання) Розчин ТМБ, Н2О2, стабілізатор, консервант (безбарвний). Зберігати за температури 2-8°CTWEEN WASH 20x 1 x 50 mlРозчин для промивання TWEEN (20x концентрат) 20-ти кратний концентрат фосфатного буфера з Твіном-20 (безбарвний). Розвести розчин для промивання TWEEN (20х) 1:20 дистильованою або деіонізованою водою (наприклад, 5 ml концентрату + 95 ml води для 8 лунок) перед використанням. Розведений розчин зберігати за температури 2-8°С не більше 7 діб5/12Редакція 2 від 22.05.2020р.SOLN STOP 1 x 13 mlСтоп-розчин (готовий до використання) Розчин 0,5 mol H2SO4 (безбарвний). Зберігати за температури 2-8°C До складу набору також входять: клейка плівка (2 шт.), схема внесення зразків (1шт.), лист контрольних випробувань та інструкція із застосування. 4.2. Додаткові реактиви, матеріали та обладнання Автоматичні піпетки змінного об’єму на 10–1000 µl та наконечники до них, мірний лабораторний посуд (10–1000 ml), деіонізована або дистильована вода, термостат на 37°С, автоматичний або напівавтоматичний промивач планшетів (вошер), спектрофотометр (рідер) для мікропланшетів на 450/620-695 nm, відповідні контейнери для відходів потенційно зараженого матеріалу, таймер, фільтрувальний папір, одноразові неопудрені рукавички, дезінфікуючі засоби.Додаткові реактиви, матеріали та обладнанняАвтоматичні піпетки змінного об’єму на 10–1000 µl та наконечники до них, мірний лабораторний посуд (10–1000 ml), деіонізована або дистильована вода, термостат на 37°С, автоматичний або напівавтоматичний промивач планшетів (вошер), спектрофотометр (рідер) для мікропланшетів на 450/620-695 nm, відповідні контейнери для відходів потенційно зараженого матеріалу, таймер, фільтрувальний папір, одноразові неопудрені рукавички, дезінфікуючі засоби. Купити ІФА-набір для якісного виявлення антитіл класу IgA до вірусу SARS-CoV-2 в Україні - медичний інтернет магазин Медшоп ..
3 000.00 грн.
